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發(fā)布者:磊建凈化
發(fā)布時(shí)間:2022-11-07
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超凈工作臺(tái)和生物安全柜是一樣的嗎?不知道你是否有類似的疑問:超凈工作臺(tái)和生物安全柜,都是為了給操作人員和環(huán)境提供不同級(jí)別的保護(hù),有什么區(qū)別呢?
(一)、超凈工作臺(tái)
超凈工作臺(tái)(clean bench)與生物安全柜(Biosafety Cabinet)不同。
超凈工作臺(tái)只能保護(hù)在工作臺(tái)內(nèi)操作的試劑等不受污染,并不保護(hù)工作人員;而生物安全柜是負(fù)壓系統(tǒng),能有效保護(hù)工作人員。
超凈工作臺(tái)超凈工作臺(tái)是為實(shí)驗(yàn)室工作提供無菌操作環(huán)境的設(shè)施,以保護(hù)實(shí)驗(yàn)免受外部環(huán)境的影響,同時(shí)為外部環(huán)境提供某些程度的保護(hù)以防污染并保護(hù)操作者。
一、原理
超凈工作臺(tái)的潔凈環(huán)境是在特定的空間內(nèi),潔凈空氣(進(jìn)濾空氣)按設(shè)定的方向流動(dòng)而形成的。以氣流方向來分,現(xiàn)有的超凈工作臺(tái)可分為垂直式,由內(nèi)向外式以及側(cè)向式。從操作質(zhì)量和對(duì)環(huán)境的影響來考慮,以垂直式較優(yōu)越。由供氣濾板提供的潔凈空氣以一個(gè)特定的速度下降通過操作區(qū),在大約操作區(qū)的中間分開,由前端空氣吸入孔和后吸氣窗吸走,在操作區(qū)下部前后部吸入的空氣混合在一起,并由鼓風(fēng)機(jī)泵入后正壓區(qū),在機(jī)器的上部, 30%的氣體通過排氣濾板從頂部排出,大約70%的氣體通過供氧濾板重新進(jìn)入操作區(qū)。為補(bǔ)充排氣口排出的空氣,同體積的空氣通過操作口從房間空氣中得到補(bǔ)充。這些空氣絕對(duì)不會(huì)進(jìn)入操作區(qū),只是形成一個(gè)空氣屏障。
國(guó)產(chǎn)的超凈工作臺(tái)許多只有供氣濾板,過濾空氣進(jìn)入操作區(qū)形成一定的正壓,空氣從設(shè)置的排氣孔和操作口排出進(jìn)入環(huán)境空氣中,這種空氣流動(dòng)方式對(duì)周圍環(huán)境和操作者都沒有保護(hù)作用。
二、調(diào)試
所在的超凈工作臺(tái)出廠前都經(jīng)過嚴(yán)格的測(cè)試,以保證正常的使用。但這并不是說,廠家的測(cè)試就能代替操作者使用前作必要的檢驗(yàn)和調(diào)試。因?yàn)槌瑑艄ぷ髋_(tái)所處的環(huán)境各異,只有經(jīng)過適當(dāng)?shù)臋z驗(yàn)和調(diào)試,才能最大限度地發(fā)揮設(shè)備的作用。
在調(diào)試前應(yīng)為機(jī)器選定一個(gè)較好的環(huán)境。將其置于一間有空氣消毒設(shè)施的無菌室是最好的,如果條件不具備,就應(yīng)將機(jī)器安放于人員走動(dòng)少、較清潔的房間中。調(diào)整各腳的高度,以保證穩(wěn)妥和操作面的水平。超凈工作臺(tái)的供電應(yīng)采用一條專門電路,以避免電路過載造成空氣流速的改變。
紫外線殺菌燈和照明用日光燈是超凈工作臺(tái)的標(biāo)準(zhǔn)配置,鼓風(fēng)機(jī)提供空氣流動(dòng)的動(dòng)力,這些部件是否正常工作是一目了然的。最困難也是最重要的是檢查空氣濾板及其密封性,它直接關(guān)系到機(jī)器的正常使用。最簡(jiǎn)單的檢查方法是營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板法。
新購(gòu)買的和久置未用的超凈工作臺(tái)除用紫外燈等照射外,最好能進(jìn)行熏蒸處理,然后在機(jī)器處于工作狀態(tài)時(shí)在操作區(qū)的四角及中心位置各放一個(gè)打開的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,兩小時(shí)后蓋上蓋并置 37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24小時(shí),計(jì)算出菌落數(shù)。平均每個(gè)平皿菌落數(shù)必須少于 0.5 個(gè)。
三、使用
超凈工作臺(tái)使用前應(yīng)用紫外燈照射30-40分鐘,并檢查操作區(qū)周圍各種可開啟的門窗處于工作時(shí)位置。操作最好在操作區(qū)的中心位置進(jìn)行,在設(shè)計(jì)上 ,這是一個(gè)較安全的區(qū)域。
在進(jìn)行操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)材料有一個(gè)初步的認(rèn)識(shí),同時(shí)了解自己所使用的設(shè)備的性能及安全等級(jí)。嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程。特定病原在任何超凈工作臺(tái)中的使用必須進(jìn)行安全性評(píng)估。如果實(shí)驗(yàn)材料會(huì)對(duì)周圍環(huán)境造成環(huán)境污染,就應(yīng)避免在無排氣濾板的型號(hào)內(nèi)使用,因?yàn)樵诹鲃?dòng)空氣中操作與散毒無異。
任何先進(jìn)的設(shè)備并不能保證實(shí)驗(yàn)的成功,動(dòng)物檢疫實(shí)驗(yàn)室超凈工作臺(tái)的使用是以無菌和避免交叉污染為目的,因此熟練的操作和明確的無菌要領(lǐng)是必不可少的。
四、維護(hù)
超凈工作臺(tái)是一臺(tái)較精密的電氣設(shè)備,對(duì)其進(jìn)行經(jīng)常性的保養(yǎng)和超凈工作臺(tái)是一臺(tái)較精密的電氣設(shè)備,對(duì)其進(jìn)行經(jīng)常性的保養(yǎng)和維護(hù)是非常重要的。維護(hù)是非常重要的。
首先要保持室內(nèi)的干燥和清潔,潮濕的空氣既會(huì)使制造材料銹蝕,還會(huì)影響電氣電路的正常工作,潮濕空氣還利于細(xì)菌、霉菌的生長(zhǎng),所以首先要保持室內(nèi)的干燥和清潔,清潔的環(huán)境還可延長(zhǎng)濾板的使用壽命。
另外,定期對(duì)設(shè)備的清潔是正常使用的重要環(huán)節(jié)。清潔應(yīng)包括使用前后的例行清潔和定期的熏蒸處理。熏蒸時(shí),應(yīng)將所有縫隙完全密封,如操作口設(shè)有可移動(dòng)擋板封蓋的類型超凈工作臺(tái),可用塑料薄膜密封。超凈工作臺(tái)的濾板和紫外殺菌燈都有標(biāo)定的使用年限,應(yīng)按期更換。
(二)、生物安全柜
生物安全柜(Biological safety cabinets,BSCs)是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),用來保護(hù)工作人員、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)品,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。
一、生物安全柜的工作原理
將柜內(nèi)空氣向外抽吸,使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài),通過垂直氣流來保護(hù)工作人員;外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器( high-efficiency particulate air filter, HEPA過濾器)過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi),以避免處理樣品被污染;柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過HEPA過濾器過濾后再排放到大氣中,以保護(hù)環(huán)境。
二、生物安全柜的分級(jí)分類
按照NSF49標(biāo)準(zhǔn),生物安全等級(jí)1級(jí)(P1)的媒質(zhì)是指普通無害細(xì)菌、病毒等微生物;生物安全等級(jí)2級(jí)(P2)的媒質(zhì)是指一般性可致病細(xì)菌、病毒等微生物;生物安全等級(jí)3級(jí)(P3)的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物,但感染后可治愈;生物安全等級(jí)4級(jí)(P4)的媒質(zhì)是指烈性/致命細(xì)菌、病毒等微生物,感染后不易治愈。此標(biāo)準(zhǔn)將生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí),可適用于不同生物安全等級(jí)媒質(zhì)的操作。
具體來說,生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過濾器。
1、一級(jí)生物安全柜本身無風(fēng)機(jī),依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流,由于不能保護(hù)柜內(nèi)樣品,目前已較少使用。
2、二級(jí)生物安全柜是目前應(yīng)用最為廣泛的柜型。按照NSF49的中的規(guī)定,二級(jí)生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)不同的型號(hào):A1型,A2(原B3)型,B1和B2型。所有的二級(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和樣品的保護(hù)。
A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。
A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測(cè)量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。
二級(jí)B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導(dǎo)管的風(fēng)機(jī)連接緊急供應(yīng)電源,目的在斷電下仍可保持安全柜負(fù)壓,以免危險(xiǎn)氣體泄漏B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除,30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。B2型為100%全排型安全柜,無內(nèi)部循環(huán)氣流,可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制。
3、三級(jí)生物安全柜是為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)而設(shè)計(jì)的,柜體完全氣密,工作人員通過連接在柜體的手套進(jìn)行操作,俗稱手套箱(Golve box),試驗(yàn)品通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染,適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)。NSF49在上世紀(jì)70年代就已經(jīng)出現(xiàn),被公認(rèn)為目前生物安全柜領(lǐng)域最完善的標(biāo)準(zhǔn)。在2002年,ANSI/NSF49正式獲得了美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)學(xué)會(huì)(American National Standard Institute, ANSI)的官方認(rèn)可,成為美國(guó)生物安全柜的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。NSF/ANSI49和EN12469是目前世界上最通用的生物安全柜國(guó)際認(rèn)證,這兩種標(biāo)準(zhǔn)對(duì)安全柜性能分級(jí)、安全性能檢測(cè)都有詳細(xì)的說明和要求。安全柜標(biāo)準(zhǔn)對(duì)規(guī)范安全柜市場(chǎng),保護(hù)研究人員起到重要的作用。
生物安全柜目前與科研密切相關(guān)的就是二級(jí)生物安全柜和三級(jí)生物安全柜。其中二級(jí)生物安全柜又可以分好幾類,但是實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用的就是30%氣體外排,70%氣體循環(huán)的A/B3型和100%氣體外排的B2型。生物安全柜不僅可以保護(hù)樣品也可以保護(hù)操作者,所以才被成為“安全”柜。
?。ㄈ⒊瑑艄ぷ髋_(tái)和生物安全柜的區(qū)別主要為以下4點(diǎn)
1、生物安全柜是一種在微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、基因重組、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、生物制品等領(lǐng)域的科研、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)中廣泛使用的安全設(shè)備,也是實(shí)驗(yàn)室生物安全中一級(jí)防護(hù)屏障中最基本的安全防護(hù)設(shè)備。
2、超凈工作臺(tái),為了保護(hù)實(shí)驗(yàn)材料而設(shè)計(jì)的,通過風(fēng)機(jī)將空氣吸入預(yù)過濾器,經(jīng)由靜壓箱進(jìn)入高效過濾器過濾,將過濾后的空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出,使操作區(qū)域達(dá)到百級(jí)潔凈度,保證生產(chǎn)對(duì)環(huán)境潔凈度的要求。只能保護(hù)樣品,不保護(hù)操作人員。
3、生物安全柜是一種負(fù)壓的凈化工作臺(tái),正確操作生物安全柜,能夠完全保護(hù)工作人員、受試樣品并防止交叉污染的發(fā)生;而超凈工作臺(tái)只是保護(hù)操作對(duì)象而不保護(hù)工作人員和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的潔凈工作臺(tái)。因此,在微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的科研、教學(xué)、臨床檢驗(yàn)和生產(chǎn)中,應(yīng)該選擇和使用生物安全柜,而不能夠選擇和使用超凈工作臺(tái)。
4、從潔凈級(jí)別看,生物安全柜也比超凈工作臺(tái)高級(jí)。
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